细胞计数及活率测定

NucleoCounter®NC-200™与传统手工细胞计数工作流程对比图
传统手工细胞计数至少包括三个移液步骤、手动操作显微镜、计数和计算。使用NucleoCounter®NC-200™计数时,用户只需按下Via1-Cassette™的活塞取样,其余步骤均由仪器完成。
传统的细胞计数方法得到的数据往往差异很大,特别是不同的操作者之间。这种差异在手工细胞计数中尤为明显,而依靠人工手动聚焦的自动细胞计数仪也会受到操作员的影响。NucleoCounter®NC-200™自动细胞计数仪使用定焦光学,并利用Via1-Cassette™标准化取样、细胞染色和计数步骤。NucleoCounter®NC-200™自动获取荧光图像,进行图像分析,为用户提供细胞总数和活率。电子数据记录存储符合21CFR Part11规范。
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含红细胞样本的细胞计数

使用“Viability and Cell Count – BloodAssay”测定全血中的单个核细胞(PBMC)的数量和活率
全血样本含有间充质干细胞(MSC)、红细胞、血小板和白细胞。Solution17可以裂解红细胞,降低血红蛋白的荧光猝灭作用,稳定吖啶橙和DAPI对PBMC的染色后,检测活细胞和死细胞。血小板没有细胞核,因此不会被染色。
全血样本染色的图像显示总细胞计数(绿色)和死细胞计数(蓝色)。
NucleoView™软件允许用户验证细胞计数的正确性。
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免疫疗法细胞制备流程中的CAR-T细胞计数

使用NucleoCounter®监测从单采血分离到形成细胞制剂的整个过程
细胞疗法中最有前景的方法之一是使用表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞免疫疗法。在临床CAR-T细胞制备的所有步骤中,必须精确地测定细胞活力和细胞数目。即使操作者不同,NucleoCounter®也可简单、可靠地测定细胞活率,为最终的病人回输严把质量关。
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成团细胞计数

NucleoCounter®测定结团球体中的细胞计数。
结团培养的细胞易形成大的聚集体。经ReagentA100和B处理,细胞膜被分解,细胞球体解聚,细胞核悬浮在溶液中。进而,细胞核被DAPI染色并自动计数。
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再生医学中的间充质干细胞计数

细胞疗法中,可从不同来源分离出间充质干细胞(MSC),例如脂肪或骨髓提取物。NucleoCounter®可提供准确的细胞计数和细胞活率。
间充质干细胞(MSCs)目前用于治疗多种疾病,主要有骨骼疾病、心脏病、肌肉骨骼失调和血液系统疾病。由于这些细胞具有较高的增殖能力和分化潜能,在靶向再生和同种异体细胞治疗中具有广阔的前景。但是,由于样品通常含有杂质,例如红细胞和脂肪,因此测定新鲜分离的MSC的活率和数量非常有挑战性。NucleoCounter®通过使用特殊的缓冲溶液来处理红细胞和脂肪组织,完全地解决了这个问题。
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细胞疗法中的微载体培养监测

微载体可作为贴壁细胞生长的支架使其增殖,而生物反应器可使细胞与微载体的复合物在培养基中悬浮。
间充质干细胞具有较高的增殖和分化能力,在靶向再生细胞治疗中具有广阔的应用前景。目前,骨髓间充质干细胞是利用细胞培养瓶二维(2D)培养的。大规模培养MSC细胞的一个具有优良前景的方法是使用微载体。NucleoCounter®仪器提供了一种准确可靠的方法,用于测定微载体培养的细胞的数量和活率。
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计数的一致性

NucleoCounter®仪器的计数一致、无关时间地点。
在仪器组装后的质量控制过程中,根据主控仪器对每个仪器进行校准。NucleoCounter®仪器无需维护,我们也可提供用于定期校验的试剂。
传统细胞计数的一个常见问题是操作者、部门和地点导致的数据差异。所有NucleoCounter®仪器的计数结果都是一致的,与时间地点无关。这是因为在质量控制过程中,每台仪器都根据主控仪器进行校准。
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